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臺式小核磁納米弛豫開關(guān)快檢技術(shù)的應(yīng)用

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       臺式小核磁-納米弛豫開關(guān)快檢技術(shù)
  隨著納米技術(shù)的發(fā)展,生物功能化超順磁性納米顆粒(連接有不同生物分子,如核酸、小分子、多肽、抗體),在生物富集、識別等方面得到廣泛的發(fā)展。生物功能化磁珠富集在生物大分子上,引起體系中橫向弛豫時(shí)間(T2)的變化。采用臺式小核磁低場核磁共振(LF-NMR)法可敏感地檢測到這一變化。將兩者結(jié)合可以構(gòu)建一種新型的,具有極低檢測限、特異性強(qiáng)、快速等特點(diǎn)的生物分子識別方法。目前,臺式小核磁結(jié)合磁納米開關(guān)這一技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于毒素、病毒、細(xì)菌等的檢測中。
  臺式小核磁-納米弛豫開關(guān)快檢技術(shù)基本原理 磁納米傳感器探測機(jī)制的基本原理是基于選擇性納米顆粒與靶標(biāo)相互作用時(shí)在分散和聚集狀態(tài)之間切換的能力,狀態(tài)轉(zhuǎn)變伴隨著溶液水質(zhì)子的自旋-自旋弛豫時(shí)間(T2)的變化。通過臺式小核磁可以敏感的捕獲這一變化,從而實(shí)現(xiàn)對靶標(biāo)的快速檢測。


  臺式小核磁-納米弛豫開關(guān)快檢技術(shù)用于細(xì)菌檢測案例 下圖顯示不加菌液的樣品(對照組磁珠)和加入沙門氏菌的樣品(磁珠+沙門氏菌)臺式小核磁檢測到的T2值差異,表明此方法可以用來對目標(biāo)微生物進(jìn)行檢測。


  為了研究不同細(xì)菌濃度對檢測方法的影響和檢測方法的靈敏度,以6種不同濃度的沙門氏菌作為檢測對象,磁珠濃度固定為0.14mg/mL。結(jié)果如下圖所示,當(dāng)細(xì)菌濃度從100cfu/mL變化到10000cfu/mL,相應(yīng)的ΔT2值從43變化到5。當(dāng)阪崎腸桿菌濃度低至1cfu/mL時(shí),ΔT2值仍然很高(ΔT2=34ms),說明了在菌濃度很低的情況下,仍能檢測出目標(biāo)菌,表明臺式小核磁檢測方法有很高靈敏度。


  借助臺式小核磁低場核磁共振儀,結(jié)合納米傳感器,能快速檢測出樣本中的目標(biāo)菌,由于免疫學(xué)特異性結(jié)合的特性,該方法對檢測靶標(biāo)物有的靈敏度與特異性。同時(shí),試驗(yàn)所用的試劑簡單、普遍,能應(yīng)用于不透明、復(fù)雜的食品介質(zhì)。
  臺式小核磁-納米弛豫開關(guān)分析技術(shù)檢測的分析物類別。
  1、病毒[46]
  2、小分子,肽[23,63,65]
  3、DNA,mRNA[1,45,46,66,67]
  4、過氧化物酶[48]
  5、蛋白酶[45,47,68]
  6、端粒酶[66]
  7、甲基化酶[46]
  8、激素[69,70]
  9、離子[60,71,72]
  10、細(xì)菌細(xì)胞[23,48]
  11、蛋白質(zhì)[23,45,49,61,69]
  12、免疫球蛋白[19]
  13、真核細(xì)胞[23]


  【參考資料:[1]李先富, 陳艷, 張之韻,等. 食源性致病菌低場磁共振快速篩選檢驗(yàn)方法[J]. 中國食品學(xué)報(bào), 2013(03):171-175.】

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